Ligase do DNA
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- Faculdade de Ciências da Universidade de Lisboa
Referência Moreira, C., (2014) Ligase do DNA, Rev. Ciência Elem., V2(1):090
DOI http://doi.org/10.24927/rce2014.090
Palavras-chave Ligase; DNA; plasmídeos; nucleótidos; moléculas; Engenharia; Genética;
Resumo
A ligase do DNA (ou DNA ligase) é uma enzima que promove a ligação entre os nucleótidos de duas moléculas de DNA.
Em Engenharia Genética e Genética Molecular esta enzima é extremamente importante, dado que esta enzima ajuda a reparar as descontinuidades das moléculas de DNA de cadeia dupla, unindo a cadeia. Por exemplo, as ligases do DNA são utilizadas em conjunto com as enzimas de restrição para inserir fragmentos de DNA em plasmídeos.
Mecanismo de funcionamento da Ligase do DNA
A ligase do DNA forma duas ligações fosfodiester covalentes entre a extremidade 3’ hidroxilo de um nucleótido (“recetor”) com a extremidade 5’ fosfato de outro nucleótido (“dador”). Esta ação requer energia fornecida pelo ATP.
O processo completo decorre em 3 etapas:
- adição de um resíduo de AMP (adenilação) ao centro ativo da enzima, e libertação de um pirofosfato
- transferência de AMP para o grupo fosfato 5’ da chamada cadeia dadora, formação de uma ligação pirofosfato
- formação de uma ligação fosfodiester entre o grupo fosfato 5’ do dador e o grupo hidroxilo 3’ do recetor
As extremidades coesivas de dois fragmentos de DNA, obtidos por ação de enzimas de restrição, tendem a emparelhar devido à complementaridade das bases, e a ligação dos fragmentos é feita pela ação da ligase do DNA.
Referências
- 1 Wikipédia DNA ligase http://en.wikipedia.org/wiki/DNA_ligase
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